当前位置:首页 > 文化 > 正文内容

硅胶柱层析(硅胶柱层析的基本原理)

2020-08-20 02:50:05文化457

大家好,小活来为大家解答以上的问题。硅胶柱层析的基本原理,硅胶柱层析这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、[编辑本段]硅胶柱层析原理 硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

硅胶柱层析(硅胶柱层析的基本原理)

2、[编辑本段]硅胶柱层析流动相 极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸[编辑本段]硅胶柱层析惯用方法 1.称量。

3、200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。

4、干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。

5、 2.搅成匀浆。

6、加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。

7、如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。

8、如果不能搅成匀浆,说明溶剂中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不与水配伍走分配色谱的话,必须预先用无水硫酸钠久置干燥。

9、氯仿用无水氯化钙干燥,以除去1%的醇。

10、如果样品对酸敏感,不能用氯仿体系过柱。

11、 3.装柱。

12、将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。

13、随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。

14、 4.压实。

15、沉降完成后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定。

16、柱床约被压缩至9/10体积。

17、无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

18、 5.上样。

19、干法湿法都可以。

20、海沙是没必要的。

21、上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。

22、然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面。

23、 6.过柱和收集。

24、柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。

25、太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱。

26、收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收一馏分;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收一馏分。

27、 7.检测。

28、要更多地使用专用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

29、 8.送谱。

30、收集的产品旋干,在送谱前通常需要重结晶。

31、如果样品太少或为液体,可过一小凝胶柱,作为送谱前的最后纯化手段。

32、可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。

33、 注意事项 1.先根据TLC方法筛选好洗脱剂,使两相邻物质Rf值之差最大化 2.将柱子必须装平整、均匀 3.考虑有限柱填料的吸附量 4.可考虑用剃度法分开并洗脱。

本文到此分享完毕,希望能帮助到大家。

扫描二维码推送至手机访问。

版权声明:文章内容摘自网络,如果无意之中侵犯了您的版权,请联系本站,本站将在3个工作日内删除。谢谢!

本文链接:http://xixia168.cn/n/wh/123336.html

标签: 层析硅胶
分享给朋友:

“硅胶柱层析(硅胶柱层析的基本原理)” 的相关文章

心理学跨考考研难吗(考研最好考的十大专业)

心理学跨考考研难吗(考研最好考的十大专业)

免费心理学考研论坛(哪个是最好的心理学考研辅导机构)心理学阅读2018-08-02 09:45:38 2019年考研的日子越来越近了。想报考心理学研究生的同学们,你们复习的怎么样了? 最新修订的《世界心理学》出版了两本心理学研究生书籍: 心理学考研1200重难点问题 心理学考研重难点手册:基础备考...

关于张曦文演的电视剧的介绍(张曦文演的电视剧)

关于张曦文演的电视剧的介绍(张曦文演的电视剧)

大家好,小编丹尼来为大家解答这个问题。张曦文演的电视剧,关于张曦文演的电视剧的介绍很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、张曦文,1980年03月07人生于中国黑龙江省哈尔滨市,女演员、歌手,毕业于中央戏剧学院,代表作《浪漫的事》《向日葵》《鸳鸯蝴蝶》。2、曾是一名花样滑冰运动员,和花滑世界冠军...

关于魔塔大陆ova的描述(魔塔大陆ova)

关于魔塔大陆ova的描述(魔塔大陆ova)

今天来聊聊关于魔塔大陆ova,关于魔塔大陆ova的描述的文章,现在就为大家来简单介绍下魔塔大陆ova,关于魔塔大陆ova的描述,希望对各位小伙伴们有所帮助。1、魔塔大陆Ar-Tonelico是日本的DVDRip。2、故事发生在被称为\\整个Soul Shell就是一个完全封闭的空间,没有天空也没有海...

孟古(孟古青真实结局)

孟古(孟古青真实结局)

大家好,小活来为大家解答以上的问题。孟古青真实结局,孟古这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、孟古在福陵陪葬努尔哈赤的众我后妃中,声名最为显赫的莫过于叶赫纳拉·孟古,她生前是努尔哈赤的第三位大妃(相当于皇后),死后又因其所生的惟一一个儿子皇太极荣登汗位并成为清朝第一帝的缘故,孟古就以初谥为...

关于黑石塔上层掉落的介绍(黑石塔上层掉落)

关于黑石塔上层掉落的介绍(黑石塔上层掉落)

大家好,小编小新来为大家解答这个问题。黑石塔上层掉落,关于黑石塔上层掉落的介绍很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、魔兽世界中重要副本,也被称为三大副本之一,60后很多团队副本的门任务都是这里完成的。2、位置是黑石山,被黑龙一族的王子奈法利安所控制,分为上下两层,进入上层需要有下层做任务得到的...

关于安顺事件的描述(安顺事件)

关于安顺事件的描述(安顺事件)

今天来聊聊关于安顺事件,关于安顺事件的描述的文章,现在就为大家来简单介绍下安顺事件,关于安顺事件的描述,希望对各位小伙伴们有所帮助。1、2014年9月5日凌晨,贵州安顺市七眼桥镇发生一起警民冲突事件,打斗中该镇派出所两名协警死亡、两名协警受伤。2、该镇派出所工作人员在9月8日向记者确认了这一事实,死...